銀杏黑斑病和輪紋病病菌生長、產孢試驗和孢子萌發(fā)試驗（二）
3結果
3.1病原菌生長和產孢試驗
3.1.1溫度對病原菌生長和產孢的影響
從表1可看出，黑斑病菌在10℃~35℃都能生長和產孢，生長適宜范圍為20℃~30℃，最適25℃；35℃產孢最多。輪紋病菌的生長溫度為10℃~30℃，不能夠耐35℃的高溫，適宜范圍為20℃~25℃，最適25℃；該菌在10℃條件下不能產孢，20℃和25℃時產孢量大，兩處理間不存在顯著性差異，兩者與其余處理相比均達到顯著水平。
3.1.2濕度對病原菌生長和產孢的影響
表2不同濕度對黑斑病菌和輪紋病菌生長和產孢的影響
從表2可看出，2種菌在相對濕度65%以上都能很好地生長。黑斑病菌在RH為75%和85%時，生長速度和產孢量都沒有顯著性差異，此時生長速度最快，RH98%時產孢最多。輪紋病菌在RH75%生長最快，RH98%產孢量最大，在RH75%~85%范圍內，產孢量沒有達到顯著水平。
3.1.3培養(yǎng)基對病原菌生長和產孢的影響
表3不同培養(yǎng)基對黑斑病菌和輪紋病菌生長和產孢的影響
由表3可知，2種菌在PDA培養(yǎng)基上比在WA、GLA上生長快，且產孢量大，特別是輪紋病菌，在PDA培養(yǎng)基上的產孢量是WA、GLA上的44~70倍。2種菌在WA培養(yǎng)基上生長得很稀疏，產孢量??；在PDA上，菌絲濃密，輪紋病菌還形成內緣菌絲稀疏、外緣菌絲濃密的同心環(huán)型菌落；在GLA上的菌落較PDA上的稀疏，輪紋病菌也不形成同心環(huán)型菌落。
3.1.4酸堿度對病原菌生長和產孢的影響
試驗結果(表4)表明，2種菌在pH值<2都不能生長，生長和產孢pH值范圍為4~11，并且以pH值5~11基質中生長為好。黑斑病菌在pH值為11的基質中生長快，但此時菌落稀疏，產孢量較少；pH值為7時，該菌生長速度僅次于pH值11，且菌絲濃密，產孢量最大；在pH值4~5和pH值9~11范圍內的產孢量沒有達到極顯著水平。輪紋病菌在pH值4~9基質中形成同心環(huán)型菌落，其中以pH值為5的基質上生長最好，氣生菌絲發(fā)達，菌落濃密，pH值為4和pH值為9的產孢量最大，兩處理間的產孢量沒有顯著性差異。
3.1.5光照對病原菌生長和產孢的影響
從表5可知，光照對黑斑病菌的生長、產孢，以及對輪紋病菌的生長都沒有顯著的影響。對于輪紋病菌，日光燈照射4d后開始形成分生孢子，自然光照射6d后形成少許分生孢子，全黑暗條件下8d開始形成分生孢子。由此可見，光照能促進輪紋病菌分生孢子的形成，且日光燈照射比自然光照射，產孢量多1倍以上。
3.2孢子萌發(fā)試驗
3.2.1溫度對分生孢子萌發(fā)的影響
從表6可看出，2種菌的分生孢子萌發(fā)溫度是10℃~35℃。黑斑病菌孢子萌發(fā)適溫為20℃~35℃，此范圍內，該菌分生孢子24h時的萌發(fā)率未達α?.??顯著水平。輪紋病菌的分生孢子萌發(fā)適宜溫度為15℃~30℃，最適為20℃。另外，在10℃的培養(yǎng)條件下，2種病原菌的分生孢子培養(yǎng)8h都沒有開始萌發(fā)，在15℃~35℃范圍內，8h的萌發(fā)率最低為6.37%，最高達86.98%。
3.2.2濕度對分生孢子萌發(fā)的影響
從表7可看出，2種菌的孢子在RH100%+水滴、RH100%條件下萌發(fā)較好，最適的是RH100%+水滴的萌發(fā)條件。黑斑病菌的分生孢子在泡水、RH90%的條件下培養(yǎng)8h都沒有開始萌發(fā)，輪紋病菌的孢子在泡水處理中8h的發(fā)芽率為0，24h的萌發(fā)率為5.8%，而在RH90%條件下，培養(yǎng)24h都沒有萌發(fā)。
3.2.3酸堿度對分生孢子萌發(fā)的影響
從表8可看出，2種菌的分生孢子在pH值2~11都能萌發(fā)。黑斑病菌的分生孢子萌發(fā)適宜pH值為2~7，最適pH值為4~5；輪紋病菌的孢子在pH值2~5范圍萌發(fā)較好，最適為pH值4。由此可見，偏酸性的環(huán)境有利于黑斑病菌和輪紋病菌的分生孢子萌發(fā)，尤其是后者。
3.2.4培養(yǎng)液對分生孢子萌發(fā)的影響
從表9可看出，黑斑病菌的分生孢子24h的發(fā)芽率在α?.??水平上沒有顯著性差異，說明該菌分生孢子萌發(fā)與培養(yǎng)液有無養(yǎng)分沒有顯著關系。而輪紋病菌的分生孢子在銀杏葉汁稀液和1%葡萄糖液中的萌發(fā)率高，且不存在顯著性差異；但與在無菌水中萌發(fā)比較就存在顯著性差異。
4討論
朱克恭研究認為銀杏葉枯病的病原菌中，黑斑病菌在6月~10月都有大量的出現(xiàn)，而輪紋病在高溫季節(jié)很少出現(xiàn)，僅在10月份才有所增加。本實驗得到相似的結果，輪紋病菌不能耐35℃的高溫，黑斑病菌耐高溫的能力強。2種菌在RH65%以上都生長好，適宜的相對濕度為75%~85%，試驗結果表明：相對濕度大有利于分生孢子形成；飽和濕度且有水滴的培養(yǎng)條件，分生孢子的發(fā)芽率最高。因此，在綜合防治中，清除銀杏果園內的雜草，降低地表面的相對濕度，可以在一定程度上減少侵染來源。泡水處理中，分生孢子的發(fā)芽率低，也許與缺氧有關。
總的來說，黑斑病菌生長、發(fā)育和產孢的溫度范圍都比輪紋病菌的廣，黑斑病菌的產孢對光照反應不敏感，其分生孢子萌發(fā)對營養(yǎng)的要求也不高，對寄主植物有更大的威脅性。朱克恭在對銀杏葉枯病的研究中，認為黑斑病菌占病原菌的主要地位，其不僅能以菌絲體在芽、落葉組織內越冬，還能以分生孢子在落葉內越冬，且長期存活，以至于黑斑病菌能夠成為病葉組織內的主要病原菌。這些說明黑斑病菌對外界環(huán)境有較強的適應性，對銀杏葉的危害起主要作用。
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