兒童侵襲性非傷寒沙門菌腸炎NTS的藥敏試驗(yàn)結(jié)果——摘要、資料與方法
摘要：目的了解成都市兒童侵襲性非傷寒沙門菌(non-typhoidal Salmonella，NTS)腸炎的臨床特征和耐藥情況，為臨床合理用藥和經(jīng)驗(yàn)治療提供參考。方法回顧性分析2022年1月—2023年12月四川省成都市糞便標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)出NTS的130例侵襲性細(xì)菌性腸炎患兒的臨床資料，以及NTS的藥敏試驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果NTS感染主要集中在4~9月份(113例，86.9%)，8月份為高峰期(36例，27.7%)。嬰幼兒(月齡<36個(gè)月)占86.2%(112/130)，主要癥狀為腹瀉(130例，100%)、發(fā)熱(123例，94.6%)和血便(112例，86.2%)。130株NTS對(duì)頭孢曲松和頭孢噻肟的敏感率分別為64.6%和63.8%。對(duì)哌拉西林他唑巴坦、呋喃妥因(硝基呋喃類)的敏感率均>90.0%。多重耐藥菌株檢出率為48.5%(63/130);38例(29.2%)患兒使用第三代頭孢菌素的臨床療效與藥敏結(jié)果不一致。結(jié)論成都地區(qū)0~6歲兒童侵襲性NTS腸炎患病高峰在8月份，嬰幼兒為高發(fā)人群。NTS耐藥情況比較嚴(yán)峻，哌拉西林他唑巴坦可能是治療兒童多重耐藥NTS感染的有效選擇，硝基呋喃類抗菌藥物可能有望用于治療多重耐藥NTS感染。
沙門菌是一種細(xì)胞內(nèi)寄生的直桿狀革蘭氏陰性菌，目前已報(bào)告有2 500多種血清型，可分為傷寒沙門菌和非傷寒沙門菌（non-typhoidal Salmonella，NTS）兩大類。2021年中國(guó)大陸食源性疾病監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)的數(shù)據(jù)顯示，NTS是細(xì)菌性食源性疾病的頭號(hào)病原。沙門菌感染的主要原因是食用受污染的食物或接觸被污染的環(huán)境表面。沙門菌對(duì)所有人群均有易感性，兒童因免疫系統(tǒng)未完善而更易遭受侵襲導(dǎo)致群體感染率最高。近年來沙門菌耐藥率總體呈升高趨勢(shì)，并且多重耐藥愈漸嚴(yán)重。本研究通過對(duì)2022年1月—2023年12月成都市130例0~6歲侵襲性NTS腸炎患兒的臨床特征和藥敏情況進(jìn)行回顧性分析，為疾病預(yù)防和合理用藥提供參考依據(jù)。
1資料與方法
1.1菌株來源
130株NTS菌株由四川省成都市2022年1月—2023年12月侵襲性NTS腸炎住院患兒糞便標(biāo)本分離所得，均經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)生化試驗(yàn)檢測(cè)確定。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡≤6歲；（2）具有黏液便、膿血便和大便次數(shù)增多；（3）糞便鏡檢有大量白細(xì)胞和數(shù)量不等的紅細(xì)胞；（4）臨床考慮為急性侵襲性細(xì)菌感染性腹瀉，符合《兒童急性感染性腹瀉病診療規(guī)范（2020年版）》中感染性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)；（5）糞便培養(yǎng)為NTS菌株。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）早產(chǎn)；（2）出生體重<2 500 g；（3）過敏性腸炎；（4）炎癥性腸病；（5）壞死性小腸結(jié)腸炎；（6）免疫缺陷；（7）腸道息肉；（8）Meckel憩室；（9）腸道手術(shù)史；（10）合并消化道外感染。本研究已通過四川省婦女兒童醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)并免除知情同意（批件號(hào)：20240607-218）。
1.2試劑及儀器
主要有VITEK 2細(xì)菌自動(dòng)鑒定系統(tǒng)（BioMérieux，法國(guó)）、細(xì)菌鑒定板和藥敏板（Beckman Coulter，美國(guó)）、哥倫比亞培養(yǎng)基（鄭州博賽生物技術(shù)股份有限公司）、SS瓊脂平板（鄭州安圖生物工程股份有限公司）、沙門菌屬診斷血清（寧波天潤(rùn)生物藥業(yè)有限公司）、兒科專用液體培養(yǎng)瓶（BioMérieux，法國(guó)）和環(huán)丙沙星（5μg）標(biāo)準(zhǔn)抗生素紙片（Oxoid，英國(guó)）。
1.3菌株培養(yǎng)和鑒定
所有細(xì)菌分離培養(yǎng)均依據(jù)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行。將收集的NTS菌株劃環(huán)線接種于木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂平板上，置于35~37℃培養(yǎng)24 h，挑取平板上呈粉紅色或黃色，帶或不帶黑色中心的可疑沙門菌單個(gè)菌落，接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板，35~37℃培養(yǎng)24 h后用菌落制備0.5~0.6麥?zhǔn)蠁挝粷岫鹊木鷳乙海?jīng)革蘭氏陰性菌鑒定卡鑒定，確定生化結(jié)果為沙門菌。
1.4藥敏試驗(yàn)
采用微量肉湯稀釋法對(duì)氨基糖苷類、抗假單胞菌青霉素+酶抑制劑類、碳青霉烯類、非廣譜頭孢菌素類（第一、二代頭孢菌素）、廣譜頭孢菌素類（第三、四代頭孢菌素）、頭霉素類、氟喹諾酮類、葉酸代謝抑制劑類、苷氨酰環(huán)素類、單環(huán)β-內(nèi)酰胺類、青霉素類、青霉素+酶抑制劑類、頭孢菌素+酶抑制劑類，共13類抗菌藥物的19種代表藥物進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。藥敏試劑均為上海星佰生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，根據(jù)藥敏板顯色情況對(duì)藥敏板條進(jìn)行判讀，經(jīng)數(shù)據(jù)分析得到每種藥物的最低抑菌濃度（minimum inhibitory concentration，MIC）值，參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)的標(biāo)準(zhǔn)M100-S27可得出敏感（susceptible）、中介（intermediate）和耐藥（resistant）3種結(jié)果。因臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)指出，沙門菌對(duì)第一、二代頭孢菌素和頭霉素不管體外藥敏結(jié)果如何，實(shí)際體內(nèi)臨床無效，故分析比較NTS菌株對(duì)抗菌藥物敏感率及多重耐藥率時(shí)未包括第一、二代頭孢菌素和頭霉素類。
1.5臨床療效判斷
用藥72 h發(fā)熱、黏液膿血便等癥狀無任何緩解者視為臨床無效。用藥72 h上述癥狀有所緩解，但不明顯；或用藥120 h仍有上述癥狀者視為臨床療效不佳。以上情況經(jīng)具有相應(yīng)抗菌藥物處方權(quán)限醫(yī)師提出，經(jīng)我院臨床藥學(xué)科會(huì)診同意后使用限制使用級(jí)抗菌藥物。
1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
采用Whonet 5.6軟件統(tǒng)計(jì)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（xˉ±s）表示，不符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以中位數(shù)（四分位數(shù)間距）［M（Q1，Q3）］表示。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，多重比較采用Bonferroni法。Bonferroni法的檢驗(yàn)水準(zhǔn)為0.017，余P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
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