原料乳三種標(biāo)準(zhǔn)菌落總數(shù)測(cè)定方法比較（二）
2.3差異顯著性分析
對(duì)三種檢測(cè)方法測(cè)定結(jié)果進(jìn)行顯著性分析，結(jié)果見(jiàn)表4。
表4方差分析
根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)分析，4種樣品間F=0.33＜1，即P＞0.05，樣品間無(wú)顯著差異，說(shuō)明該測(cè)定結(jié)果適用于不同樣品的檢測(cè)；三種方法間F=2.09＞F0.05，即P＜0.05，三種方法測(cè)定結(jié)果存在顯著差異，即IDF 100A：1987＞FDA BAM—2001＞GB/T 4789.2—2010。
2.4測(cè)定結(jié)果分析
對(duì)表2、表3、表4測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較分析，IDF 100A：1987檢出率最高，營(yíng)養(yǎng)全面，菌落易于分辨，缺點(diǎn)是檢驗(yàn)周期長(zhǎng)；FDA BAM—2001優(yōu)于GB/T 4789.2—2010，其共同優(yōu)點(diǎn)是方法簡(jiǎn)單，檢驗(yàn)周期短。檢驗(yàn)方法中影響檢驗(yàn)結(jié)果的主要因素包括培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間、計(jì)數(shù)方法等。
2.4.1培養(yǎng)基成分
培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成為細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖提供了必需的碳源、氮源、能源、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽和水等營(yíng)養(yǎng)元素。GB/T 4789.2—2010和FDA BAM—2001使用的培養(yǎng)基均為平板計(jì)數(shù)瓊脂（PCA）培養(yǎng)基，與世界乳品聯(lián)合會(huì)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)IDF 100A：1987使用的IDF培養(yǎng)基相比，IDF 100A：1987培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)更全面，利于細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖，對(duì)檢出率的提高起了主要作用，而且其培養(yǎng)基顏色淺，易于計(jì)數(shù)，流動(dòng)性好，容易與樣品稀釋液混勻。說(shuō)明在菌落計(jì)數(shù)中，IDF培養(yǎng)基要優(yōu)于平板計(jì)數(shù)瓊脂（PCA）培養(yǎng)基。
2.4.2培養(yǎng)溫度
由于各種食品中所分布的細(xì)菌種類(lèi)不同，其最佳檢測(cè)溫度也不盡相同。實(shí)驗(yàn)采用的三種檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中使用的培養(yǎng)溫度分別為37、30、35℃。其中，GB/T 4789.2—2010和FDA BAM—2001的主要區(qū)別在于計(jì)數(shù)范圍和培養(yǎng)溫度，由表2結(jié)果表明，35℃條件下菌落總數(shù)的檢出率高于37℃，35℃更適于原料乳中細(xì)菌的生長(zhǎng)。
2.4.3培養(yǎng)時(shí)間
從培養(yǎng)周期看，培養(yǎng)時(shí)間越長(zhǎng)，同類(lèi)別微生物生長(zhǎng)繁殖的代數(shù)越多，數(shù)量也就越多。GB/T 4789.2—2010和FDA BAM—2001的培養(yǎng)周期短為48 h，而IDF 100A：1987為72 h，這可能也是表3結(jié)果中IDF 100A：1987檢出率高于GB/T 4789.2—2010和FDA BAM—2001的原因。但培養(yǎng)周期太長(zhǎng)，不利于快速、大批量的檢測(cè)。
2.4.4稀釋液
培養(yǎng)介質(zhì)對(duì)細(xì)菌增長(zhǎng)有一定影響，GB/T 4789.2—2010和FDA BAM—2001采用的稀釋液為磷酸鹽緩沖溶液或生理鹽水，IDF 100A：1987采用蛋白胨溶液。蛋白胨溶液中含有較多有利于細(xì)菌生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且對(duì)食品中已受損的細(xì)菌細(xì)胞有一定的保護(hù)作用，而且檢樣稀釋至傾注平板在15 min內(nèi)完成，時(shí)間較短，對(duì)菌落檢出率的影響可忽略不計(jì)。因此在制備樣品稀釋液時(shí)，采用蛋白胨溶液要比磷酸鹽緩沖液或生理鹽水更能提高菌落總數(shù)的檢出率。
2.4.5計(jì)數(shù)范圍
計(jì)數(shù)范圍的選擇在很大程度上也會(huì)影響檢出率。理論上講，計(jì)數(shù)范圍越小，會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏小。三種檢測(cè)方法的計(jì)數(shù)范圍分別為：GB/T 4789.2—2010 30～300 CFU，IDF 100A：1987 10～300 CFU，F(xiàn)DA BAM—2001 25～250 CFU。試驗(yàn)結(jié)果顯示，IDF 100A：1987的檢測(cè)結(jié)果最大，與預(yù)測(cè)結(jié)果基本吻合。
3小結(jié)
原料乳中菌落總數(shù)的測(cè)定方法有多種，而對(duì)于培養(yǎng)溫度的選擇應(yīng)選擇兼顧體溫型和室溫型兩類(lèi)微生物，國(guó)外采用35℃是偏體溫型，采用30℃是偏室溫型，而國(guó)內(nèi)統(tǒng)一選擇37℃應(yīng)用于所有食品，在一定程度上不利于微生物的檢出。通過(guò)對(duì)GB/T 4789.2—2010，IDF 100A：1987和FDA BAM—2001中規(guī)定的菌落總數(shù)測(cè)定方法進(jìn)行比較分析發(fā)現(xiàn)，三種標(biāo)準(zhǔn)的測(cè)定結(jié)果間存在顯著性差異，其中，IDF 100A：1987方法中培養(yǎng)基成分的營(yíng)養(yǎng)全面，檢出率最高，但檢驗(yàn)周期較長(zhǎng)，不利于快速檢測(cè)；在培養(yǎng)時(shí)間相同、培養(yǎng)基成分相同時(shí)，F(xiàn)DA BAM—2001的檢出率高于GB/T 4789.2—2010，說(shuō)明培養(yǎng)溫度為35℃時(shí)，更有利于原料乳中細(xì)菌的生長(zhǎng)，便于菌落總數(shù)的檢出；在原料乳的檢測(cè)上，GB/T 4789.2—2010的檢出率略低于IDF 100A：1987和FDA BAM—2001。
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