產(chǎn)脂肪酶地衣芽孢桿菌LD-1302篩選、培養(yǎng)基及產(chǎn)酶條件研究(四)
2.6pH對(duì)LD-1302產(chǎn)酶活性的影響
接種量為3.75×105CFU/mL、橄欖油、椰子油、葵花籽油為有機(jī)碳源時(shí),菌株LD-1302在pH 8下有最大脂肪酶活,分別為(29.97±0.33)U/mL、(19.98±0.23)U/mL、(19.98±0.67)U/mL。(圖6(a)、圖6(b)、圖6(c))。
圖6 pH對(duì)LD-1302產(chǎn)脂肪酶的影響
采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)可知:pH、時(shí)間的P=0.00<0.01,表明pH、時(shí)間均對(duì)酶活影響極顯著。由圖6-1 pH-酶活的同類(lèi)子集結(jié)果可知:pH 5、pH 6時(shí),酶活均值分別為5.69 U/mL、8.21 U/mL,在同一子集中,表明兩者對(duì)產(chǎn)脂肪酶活無(wú)明顯差異;pH 7、pH 9時(shí),酶活均值分別為14.21 U/mL、13.84 U/mL,在同一子集中,表明兩者對(duì)產(chǎn)脂肪酶活無(wú)明顯差異,但產(chǎn)脂肪酶活效果優(yōu)于前兩者;pH 8時(shí),酶活均值為22.87 U/mL,與pH 5、pH 6、pH 7、pH 9分屬不同子集,表明pH 8時(shí),產(chǎn)脂肪酶活效果最好;由圖6(a)時(shí)間-酶活的同類(lèi)子集結(jié)果可知:24 h、48 h、72 h時(shí),酶活均值分別為12.36 U/mL、17.65 U/mL、8.88 U/mL,分屬不同子集,表明三者對(duì)酶活的影響有明顯差異,且48 h時(shí),產(chǎn)脂肪酶活效果最好。由圖6(b)pH-酶活的同類(lèi)子集結(jié)果可知:pH 5時(shí),酶活均值為3.18 U/mL;pH 6、pH 7、pH 9時(shí),酶活均值分別為7.52 U/mL、8.80 U/mL、7.66 U/mL,在同一子集中,表明三者對(duì)產(chǎn)脂肪酶活無(wú)明顯差異,但產(chǎn)脂肪酶活效果優(yōu)于前者;pH 8時(shí),酶活均值為15.98 U/mL,與pH 5、pH 6、pH 7、pH 9分屬不同子集,表明pH 8時(shí),產(chǎn)脂肪酶活效果最好;由圖6(b)時(shí)間-酶活的同類(lèi)子集結(jié)果可知:24 h時(shí),酶活均值為7.10 U/mL;48 h、72 h時(shí),酶活均值分別為9.99 U/mL、8.79 U/mL,在同一子集中,表明兩者對(duì)產(chǎn)脂肪酶活無(wú)明顯差異,但產(chǎn)脂肪酶活優(yōu)于前者,且在48 h時(shí)酶活均值最大。由圖6(c)pH-酶活的同類(lèi)子集結(jié)果可知:pH 5、pH 6時(shí)酶活均值分別為4.55 U/mL、6.03 U/mL,且在同一子集中,表明兩者對(duì)產(chǎn)脂肪酶活無(wú)明顯差異;pH 7、pH 9時(shí)酶活均值分別為8.25 U/mL、9.51 U/mL,在同一子集中,表明兩者對(duì)產(chǎn)脂肪酶活無(wú)明顯差異,但產(chǎn)脂肪酶活效果優(yōu)于前者;而pH 8時(shí)酶活均值為14.95 U/mL,且與pH 5、pH 6、pH 7、pH 9分屬不同子集,表明pH 8時(shí),產(chǎn)脂肪酶活效果最好;由圖6(c)時(shí)間-酶活的同類(lèi)子集結(jié)果可知:24 h時(shí)酶活均值為5.39 U/mL,48 h、72 h時(shí)酶活均值分別為10.92 U/mL、9.66 U/mL,在同一子集中,兩者對(duì)產(chǎn)脂肪酶活無(wú)明顯差異,但產(chǎn)脂肪酶活優(yōu)于前者,且在48 h時(shí)酶活均值最大。因此,菌株LD-1302的最適pH為8,且在pH 5~pH 9的培養(yǎng)條件下也存在一定的產(chǎn)脂肪酶活性。
2.7溫度對(duì)LD-1302產(chǎn)酶活性的影響
接種量為3.75×105CFU/mL、pH為8、以橄欖油、椰子油、葵花籽油為碳源時(shí),菌株LD-1302在37℃條件下?lián)u瓶發(fā)酵48h后產(chǎn)脂肪酶活最高,依次為(30.97±0.58)U/mL、(20.98±1.2)U/mL、(20.31±0.58)U/mL;產(chǎn)脂肪酶活性跟溫度的關(guān)系均為37℃>27℃>47℃(圖7)。
采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)可知:溫度、時(shí)間的P=0.00<0.01,表明溫度、時(shí)間均對(duì)酶活影響極顯著。由7(a)溫度-酶活的同類(lèi)子集結(jié)果可知:27℃、47℃時(shí)酶活均值分別為16.17 U/mL、16.35 U/mL,在同一子集中,表明兩者對(duì)產(chǎn)脂肪酶活無(wú)明顯差異;37℃時(shí)酶活均值為25.97 U/mL,且與前兩者分屬不同子集,表明37℃時(shí),產(chǎn)脂肪酶活效果優(yōu)于前兩者;由7(a)時(shí)間-酶活的同類(lèi)子集結(jié)果可知:24 h、72 h時(shí)酶活均值分別為18.54 U/mL、17.16 U/mL,在同一子集中,表明兩者對(duì)產(chǎn)脂肪酶活無(wú)明顯差異,而48 h時(shí)酶活均值為22.79 U/mL,且與前兩者分屬不同子集,表明培養(yǎng)時(shí)間為48 h時(shí),產(chǎn)脂肪酶活效果最好。由7(b)溫度-酶活的同類(lèi)子集結(jié)果可知:27℃、47℃時(shí)酶活均值分別為10.02 U/mL、9.06 U/mL,在同一子集中,表明兩者對(duì)產(chǎn)脂肪酶活無(wú)明顯差異;37℃時(shí)酶活均值為14.95 U/mL,且與前兩者分屬不同子集,表明37℃時(shí),產(chǎn)脂肪酶活效果優(yōu)于前兩者;由7(b)時(shí)間-酶活的同類(lèi)子集結(jié)果可知:24 h、72 h時(shí)酶活均值分別為9.95 U/mL、9.73 U/mL,在同一子集中,表明兩者對(duì)產(chǎn)脂肪酶活無(wú)明顯差異,而48 h時(shí)酶活均值為14.35 U/mL,且與前兩者分屬不同子集,表明培養(yǎng)時(shí)間為48 h時(shí),產(chǎn)脂肪酶活效果最好。由7(c)溫度-酶活的同類(lèi)子集結(jié)果可知:27℃、37℃、47℃時(shí)酶活均值分別為7.69 U/mL、14.91 U/mL、10.84 U/mL,分屬不同子集,表明三者對(duì)產(chǎn)脂肪酶活有明顯差異,且37℃時(shí)產(chǎn)脂肪酶活效果最好;由7(c)時(shí)間-酶活的同類(lèi)子集結(jié)果可知:24h、48h、72 h時(shí)酶活均值分別為7.47 U/ml、15.39 U/ml、10.58 U/ml,分屬不同子集,表明三者對(duì)產(chǎn)脂肪酶活有明顯差異,且培養(yǎng)時(shí)間為48 h時(shí),產(chǎn)脂肪酶活效果最好。因此,菌株LD-1302的最適產(chǎn)酶溫度為37℃,且在27℃、47℃的培養(yǎng)條件下也存在一定的產(chǎn)脂肪酶活性。
圖7溫度對(duì)LD-1302產(chǎn)脂肪酶的影響
產(chǎn)脂肪酶地衣芽孢桿菌LD-1302篩選、培養(yǎng)基及產(chǎn)酶條件研究(一)
產(chǎn)脂肪酶地衣芽孢桿菌LD-1302篩選、培養(yǎng)基及產(chǎn)酶條件研究(二)
產(chǎn)脂肪酶地衣芽孢桿菌LD-1302篩選、培養(yǎng)基及產(chǎn)酶條件研究(三)
產(chǎn)脂肪酶地衣芽孢桿菌LD-1302篩選、培養(yǎng)基及產(chǎn)酶條件研究(四)
產(chǎn)脂肪酶地衣芽孢桿菌LD-1302篩選、培養(yǎng)基及產(chǎn)酶條件研究(五)
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