球形芽孢桿菌生長曲線變化
根據(jù)測試和研究現(xiàn)狀選擇微生物為球形芽孢桿菌。
試驗方法與實驗設(shè)備
將菌種保存在安瓿瓶中的干粉。首先要將其開管、恢復(fù)培養(yǎng),然后在一定時間計數(shù)后保藏,以備后續(xù)使用。
計數(shù)
采用全自動菌落計數(shù)器進(jìn)行計數(shù),設(shè)備型號為QXC-30。
觀測形態(tài)
采用掃描電子顯微鏡(SEM)進(jìn)行觀測細(xì)菌在不同階段的生長形態(tài),設(shè)備型號為EM-30AX。
試驗結(jié)果與分析
細(xì)菌生長曲線的測定
本文根據(jù)現(xiàn)場水質(zhì)取樣測試其離子含量,模擬配制兩種現(xiàn)場水質(zhì),選擇A、B兩種典型水質(zhì)條件,以蒸餾水(下文以O(shè)表示)為基準(zhǔn)實驗對象,研究細(xì)菌的生長曲線變化。其A和B液離子含量檢測結(jié)果如表1所示。
表1 A和B液中各離子含量
培養(yǎng)基編號分別為:O1,O2,A1,A2,B1,B2;其中1表示采用100ml的培養(yǎng)基,2表示的是采用50ml的培養(yǎng)基,用以研究初始培養(yǎng)基量(裝液量)對細(xì)菌生長的影響。將培養(yǎng)的菌懸液分裝至各培養(yǎng)瓶中,使原始濃度均為1.20×107個/ml。用蒸餾水配置該細(xì)菌生長所需的100ml培養(yǎng)基,其生長曲線如圖1所示。從圖中可以看出,該細(xì)菌在前6小時內(nèi)增長速率較為緩慢,即為延遲期。細(xì)菌繁殖數(shù)量少,代謝活躍,為后期細(xì)菌增長繁殖儲備酶、能量以及中間產(chǎn)物等[3]。6小時之后增長速率加快,到達(dá)對數(shù)增長期。細(xì)菌以穩(wěn)定的幾何級數(shù)極快增長,持續(xù)4小時左右。這階段的細(xì)菌形態(tài)、染色、生物活性都很典型,是研究細(xì)菌性狀的最佳階段。在10小時左右活菌數(shù)量達(dá)到最高,約為1.72×108個/ml,隨后在這個數(shù)量值上下波動,即為進(jìn)入穩(wěn)定期。該期的生長菌群總數(shù)處于平坦階段,但細(xì)菌群體活力變化較大。由于培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)消耗,毒性產(chǎn)物(有機酸、H2O2等)積累、pH下降等不利因素的影響,細(xì)菌繁殖速度漸趨下降,相對細(xì)菌死亡數(shù)開始逐漸增加,此期細(xì)菌增殖數(shù)與死亡數(shù)漸趨平衡。細(xì)菌形態(tài)也逐漸變長、變大,細(xì)菌數(shù)量和形態(tài)變化如圖2所示。隨著時間的逐漸延長,死亡細(xì)菌數(shù)越來越多,超過增殖率,到達(dá)衰亡期。細(xì)菌在培養(yǎng)液A和B中的生長曲線和在蒸餾水中測定的生長曲線形狀比較接近。
圖1細(xì)菌在蒸餾水中的生長曲線
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