菌核凈與解淀粉芽孢桿菌Cas02生長曲線繪制，篩選出煙草赤星病防治效果更好的復配劑
煙草是一種重要的經(jīng)濟作物，也是我國主要的稅收經(jīng)濟作物之一。煙草在大田生長過程中會受到各種病原菌的侵染、危害，其中由半知菌亞門鏈格孢屬真菌鏈格孢菌(Alternaria alternata)引起的赤星病是一種重要侵染性病害。赤星病主要發(fā)生在煙草成熟期，侵染初期在葉片上出現(xiàn)黃褐色圓形小斑點，以后變成褐色，隨著病害擴展病斑直徑可達1-2厘米，病斑質(zhì)脆易破，天氣干旱時有可能在病斑中部產(chǎn)生破裂。病害嚴重時，許多病斑相互連接合并，致使病斑枯焦脫落，進而造成整個葉片破碎而無使用價值。
煙草赤星病的防治主要包括化學防治、農(nóng)業(yè)防治和生物防治等幾種方法，其中化學防治見效快，是目前主要的赤星病防治方法，但化學農(nóng)藥的長期大量使用會導致病原菌產(chǎn)生抗藥性，同時藥劑殘留對環(huán)境的危害不容小覷。生物防治因其安全、對環(huán)境友好等特點而被廣泛關(guān)注，尤其是利用生防菌進行病害的防控是當前研究的熱點。
利用生防菌防控植物病害是一種環(huán)境友好、安全高效的方法，生防菌在植物葉際、根際等部位定殖后可以形成穩(wěn)定的群落，提供持續(xù)的防病作用，減少病害的反復發(fā)生。此外，一些生防菌具有廣泛的防治譜，能夠同時抑制多種植物病原菌。與化學農(nóng)藥相比，生防菌由于其作用機制多樣，病原微生物產(chǎn)生抗藥性的風險相對較低。但是利用生防菌進行病害也存在一些弊端，如生防菌見效慢、活性易受環(huán)境因素影響，防治效果可能出現(xiàn)波動等問題。
生防菌和化學藥劑通過不同的機制作用于病原體，聯(lián)合使用可以實現(xiàn)互補作用，提高防治效果。聯(lián)合使用還可以減少化學藥劑的使用量，延緩病原體對藥劑產(chǎn)生抗性的速度，延長藥劑的有效期。生防菌不僅可以直接抑制病原體，還能夠激發(fā)植物的抗病性，增強植物自身的防御能力，這種誘導抗性的作用是化學藥劑難以實現(xiàn)的。此外，減少化學藥劑的使用量有助于降低農(nóng)藥殘留和環(huán)境污染，符合可持續(xù)農(nóng)業(yè)發(fā)展的要求。然而，使用生防菌-化學藥劑協(xié)同防治煙草赤星病的方法少有研究報道。
研究發(fā)現(xiàn)，菌核凈與解淀粉芽孢桿菌Cas02對煙草赤星病菌均有較高的毒力，同時生長曲線表明兩者具有很好的相容性。且復配劑使用比單獨使用防治效果好，產(chǎn)生了良好的協(xié)同防治作用。針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，下面提供解淀粉芽孢桿菌聯(lián)合菌核凈在防治煙草赤星病中的應(yīng)用。
篩選防治煙草赤星病的高效、安全的復配劑，上述技術(shù)方案采用菌絲生長速率法測定菌核凈與解淀粉芽孢桿菌Cas02對煙草赤星病菌(Alternaria alternata)的毒力，通過繪制生長曲線測定兩者之間的相容性。通過測定兩者不同復配比例對煙草赤星病菌的聯(lián)合毒力以及室內(nèi)盆栽防效試驗篩選防治效果更好的復配劑。
由圖2解淀粉芽孢桿菌Cas02的生長曲線可知，加入菌核凈抑制中濃度與不加菌核凈的NB培養(yǎng)基中培養(yǎng)的Cas02生長情況基本一致，說明該濃度下菌核凈與Cas02相容性很好，可進行復配。
結(jié)果表明，菌核凈與解淀粉芽孢桿菌Cas02對煙草赤星病菌均有較高的毒力，EC50值分別為4.86μg/mL和OD600值為0.4916。生長曲線表明兩者具有很好的相容性。除復配比例V(菌核凈)：V(Cas02)為1:9，8:2，9:1時沒有協(xié)同增效作用，其它比例均具有不同增效作用。其中，增效作用最好的是7:3，增效比率為1.32，實際抑菌率達到67.61％。室內(nèi)盆栽試驗結(jié)果表明，兩種復配比例間差異不顯著，但是復配劑使用比單獨使用防治效果好，復配劑V(菌核凈)：V(Cas02)＝7:3時病情指數(shù)最低，與CK呈顯著差異，防治效果最好，達到75.71％。
上述技術(shù)方案操作步驟簡單，可操作性強，成本低，便于推廣實施，同時對煙草赤星病的防治效果極佳，具有良好的實際應(yīng)用價值。
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